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高壓蒸氣滅菌的使用方法與注意事項(xiàng)

高壓蒸汽滅菌的使用方法與注意事項(xiàng)       

高壓蒸汽滅菌的原理

在密閉的蒸鍋內(nèi),其中的蒸汽不能外溢,壓力不斷上升,使水的沸點(diǎn)不斷提高,從而鍋內(nèi)溫度也隨之增加。在0.1MPa的壓力下,鍋內(nèi)溫度達(dá)121℃。在此蒸汽溫度下,可以很快殺死各種細(xì)菌及其高度耐熱的芽孢。


高壓蒸汽滅菌的操作方法

(1)在外層鍋內(nèi)加適量的水,將需要滅菌的物品放入內(nèi)層鍋,蓋好鍋蓋并對(duì)稱地扭緊螺旋。

(2)加熱使鍋內(nèi)產(chǎn)生蒸氣,當(dāng)壓力表指針達(dá)到 33.78kPa時(shí),打開排氣閥,將冷空氣排出,此時(shí)壓力表指針下降,當(dāng)指針下降至零時(shí),即將排氣閥關(guān)好。

(3)繼續(xù)加熱,鍋內(nèi)蒸氣增加,壓力表指針又上升,當(dāng)鍋內(nèi)壓力增加到所需壓力時(shí),將火力減小,按所滅菌物品的特點(diǎn),使蒸氣壓力維持所需壓力一定時(shí)間,然后將滅菌器斷電或斷火,讓其自然冷后再慢慢打開排氣閥以排除余氣,然后才能開蓋取物。


高壓蒸汽滅菌的關(guān)鍵

完全排除鍋內(nèi)空氣,使鍋內(nèi)全部是水蒸氣,滅菌才能徹底。高壓滅菌放氣有幾種不同的做法,但目的都是要排凈空氣,使鍋內(nèi)均勻升溫,保證滅菌徹底。

排凈鍋內(nèi)空氣的常用方法

關(guān)閉放氣閥,通電后,待壓力上升到0.05MPa時(shí),打開放氣閥,放出空氣,待壓力表指針歸零后,再關(guān)閉放氣閥。關(guān)閥再通電后,壓力表上升達(dá)到0.1MPa時(shí),開始計(jì)時(shí),維持壓力0.1~0.15MPa 20分鐘。


降壓到一定程度后可緩慢放氣 / 壓力平衡后開蓋

到達(dá)保壓時(shí)間后,即可切斷電源,在壓力降到0.5MPa,可緩慢放出蒸氣,應(yīng)注意不要使壓力降低太快,以致引起激烈的減壓沸騰,使容器中的液體四溢。當(dāng)壓力降到零后,才能開蓋,取出培養(yǎng)基,擺在平臺(tái)上,以待冷凝。不可久不放氣,引起培養(yǎng)基成分變化,以至培養(yǎng)基無法擺斜面。一旦放置過久,由于鍋爐內(nèi)有負(fù)壓,蓋子打不開,只要將放氣閥打開,大氣壓入,內(nèi)外壓力平衡,蓋子便易打開了。


關(guān)于高壓蒸汽滅菌的滅菌時(shí)間和滅菌壓力

對(duì)高壓滅菌后不變質(zhì)的物品,如無菌水、栽培介質(zhì)、接種用具,可以延長滅菌時(shí)間或提高壓力。而培養(yǎng)基要嚴(yán)格遵守保壓時(shí)間,既要保壓徹底,又要防止培養(yǎng)基中的成分變質(zhì)或效力降低,不能隨意延長時(shí)間。


高壓蒸汽滅菌的注意事項(xiàng):

(1)待滅菌的物品放置不宜過緊。

(2)必須將冷空氣充分排除干凈,否則鍋內(nèi)溫度達(dá)不到規(guī)定溫度,影響滅菌效果。

(3)滅菌完畢后,不可立即放氣減壓,否則瓶內(nèi)液體會(huì)劇烈沸騰,沖掉瓶塞而外溢甚至導(dǎo)致容器爆裂。須待滅菌器內(nèi)壓力降至與大氣壓相等后才可開蓋。

(4)裝培養(yǎng)基的試管或瓶子的棉塞上,應(yīng)包油紙或牛皮紙,以防冷凝水入內(nèi)。

(5)為了確保滅菌效果,應(yīng)定期檢查滅菌效果。

       常用的方法是將硫磺粉末(熔點(diǎn)為115℃)或安息香酸(熔點(diǎn)為120℃)置于試管內(nèi),然后進(jìn)行滅菌試驗(yàn)。如上述物質(zhì)熔化,則說明高壓蒸氣滅菌器內(nèi)的溫度已達(dá)要求,滅菌的效果是可靠的。也可將檢測(cè)滅菌器效果的變色膠紙(其上有溫度敏感指示劑)貼于待滅菌的物品外包裝上,如膠紙上指示劑變色,亦說明滅菌效果是可靠的。

(6)現(xiàn)在已有微電腦自動(dòng)控制的高壓蒸氣滅菌器,只需放去冷氣后,儀器即可自動(dòng)恒壓定時(shí),時(shí)間一到則自動(dòng)切斷電源并鳴笛,使用起來很方便。

 ( 7 ) 先滅菌再清洗原則:對(duì)于任何高壓滅菌后會(huì)重復(fù)使用的污染(有潛在感染性)器材不應(yīng)當(dāng)事先清洗,必須在高壓滅菌或消毒后再進(jìn)行清洗、修復(fù)。


高壓蒸汽滅菌的對(duì)象/應(yīng)用

高壓蒸汽滅菌是最常用的滅菌方法,一般以 101.33kPa處理15~20min,可達(dá)到對(duì)物品進(jìn)行滅菌的目的。凡耐高溫和潮濕的物品,如常用培養(yǎng)基、生理鹽水、衣服、紗布、玻璃器材等都可用本法滅菌。

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